ДНК цитомегаловируса – анализ ПЦР на ЦМВ

Характеристика

Содержание:

Cytomegalovirus – это вирусная инфекция, обнаруженная во всех уголках земного шара. Попадая в организм человека, возбудитель запускает инкубационный период. У разных людей он может длится от 20 до 60 суток. После этого наступает острая фаза, продолжающаяся от 2 до 8 недель. В здоровом организме инфекция никак себя не проявляет. При снижении иммунитета происходит ее активизация. Реальную опасность возбудитель представляет для лиц с иммунодефицитом, новорожденных детей и беременных женщин.

Зачастую проявления цитомегаловирусной инфекции путают с такими болезнями, как грипп, ОРЗ, ОРВИ и простуда. Симптоматика этих патологий схожа. Важно вовремя выявить возбудитель в организме человека, чтобы предотвратить возможные осложнения. После прохождения инкубационного периода CMV вызывает острое, латентное или персистентное течение болезни. При малейшем ослаблении иммунитета активизируется вновь.

Пути заражения

Передается инфекция повсеместно. Любой человек, контактирующий с носителем, может заразиться. Предположительно вирус передается контактно-бытовым путем. Несмотря на это, принято считать цитомегаловирус недостаточно контагиозным. Чаще инфицирование происходит через биологические жидкости: при обмене слюной или, например, использовании одной посуды.

Нередко патологию именуют болезнью поцелуя. Наибольшая ассоциация возбудителя происходит в слюнных железах. Из организма больного вирус выделяется с калом, мочой, слюной, мокротой и даже слезами.

Распространенный путь инфицирования – половой. При незащищенном контакте возбудитель с легкостью проникает от одного партнера к другому. При этом носитель может не иметь явных признаков болезни. Дети приобретают инфекцию вертикальным путем: при прохождении через родовой канал зараженной женщины. Также передать вирус новоиспеченная мама может через грудное молоко.

Симптоматика

В здоровом организме возбудитель не проявляет себя. В течение всей жизни он может находиться в латентном состоянии, спать. С наступлением кризисного времени, ослаблением сопротивляемости начинается активный период. В группу риска входят:

  • пожилые люди и новорожденные дети;
  • беременные женщины с небольшим сроком и роженицы;
  • ВИЧ-инфицированные;
  • пациенты, прошедшие лечение цитостатиками.

По истечении инкубационного периода возникают первые проявления инфекции. У человека повышается температура тела, возникает озноб и боль в мышцах. Также пациенты жалуются на головную боль и признаки интоксикации. Может возникнуть мононуклеозоподнобное течение болезни, когда у человека увеличиваются лимфоузлы, появляется боль в горле, слезотечение и насморк. Лабораторная диагностика показывает изменение состава крови. При сниженном иммунитете и у носителей ВИЧ патология может вызывать необратимые изменения и даже привести к летальному исходу. Практика показывает, что возбудитель может проявляться тремя разными способами:

  • по типу ОРВИ – пациента беспокоит высокая температура, боль в горле, насморк и кашель, увеличение лимфоузлов и воспаление слюнных желез;
  • генерализованной формой – воспаляются практически все внутренние органы (печень, желудок, селезенка, надпочечники, поджелудочная), дополняется бронхитами, пневмонией;
  • основным ударом по мочеполовой системе – пациента беспокоит боль в животе, воспаление почек с мочевым пузырем, высыпания на гениталиях.

Привычные антибиотики не могут справиться с возбудителем, как при классическом бактериальном течении бронхита или пиелонефрита. Напротив, неправильное и несвоевременное использование противомикробных средств может усугубить состояние пациента. Поэтому так важно вовремя выявить инфекцию.

Кому назначают обследование на ЦМВИ?

Несмотря на то, что цитомегаловирус после заражения остается в организме пожизненно, опасность для здоровья в большинстве случаев не представляет. Анализ на цитомегаловирус необходим людям из группы риска, которые подвержены агрессивному воздействию инфекции на здоровье. Активное размножение вирионов и поражение внутренних органов возникает при угнетении иммунной системы. Не менее опасно внутриутробное заражение плода, особенно в первом триместре беременности, когда происходит закладка органов и систем.

Проведение анализов

Группы риска, которым необходимо назначение анализа на цитомегаловирус:

  • женщины в период подготовки к зачатию ребенка;
  • беременные;
  • приобретенные и врожденные иммунодефициты, в том числе ВИЧ/СПИД;
  • прием иммуносупрессивной терапии аутоиммунных заболеваний, после трансплантации органов, в период химиотерапии и лучевой терапии злокачественных опухолей;
  • онкология;
  • новорожденные с внутриутробным заражением ЦМВИ;
  • дети, часто и длительно болеющие простудными заболеваниями и ОРВИ.

При низком уровне защитных сил организма вирус поражает внутренние органы и центральную нервную системы до появления клинических признаков болезни (в инкубационном периоде). Диагностика ЦМВИ при возникновении симптомов требует длительного лечения и сопряжена с развитием осложнений. Своевременное выявления инфекции в первые дни после заражения позволяет предупредить прогрессирование болезни и снизить риск нежелательных последствий.

Подготовка и правила сдачи анализа

ПЦР на ЦМВ предусматривает специальные правила подготовки:

  1. За несколько дней до исследования необходимо прекратить прием антибактериальных препаратов. Если этого не сделать, то возникнут проблемы при обнаружении ДНК.
  2. За час до забора материала необходимо воздержаться от курения.
  3. За 2 дня до проведения процедуры нужно исключить из рациона жиры, а также не употреблять алкоголь.
  4. Накануне сдачи биоматериала следует воздержать от инвазивных процедур.
  5. Кровь для выявления патогена рекомендуется сдавать утром до приема пищи. Можно сделать это и через 6 часов после еды.
  6. Если ПЦР будет производиться на основе анализа соскоба из влагалища и цервикального канала, то за несколько дней до процедуры необходимо воздержаться от половых контактов и спринцеваний.
  7. Если для анализа требуется урина, то следует собирать ее в утренние часы и обязательно подмыться перед этим. Для обнаружения патогена в моче необходимо доставить емкость в лабораторию как можно раньше.
  8. Перед сдачей слюны не рекомендуется чистить зубы и есть.

За несколько дней до исследования необходимо прекратить прием антибактериальных препаратов
Синдром раздраженного кишечника является одним из поводов для ПЦР-исследования
За 2 дня до проведения процедуры нужно исключить из рациона жиры, а также не употреблять алкоголь
Если ПЦР будет производиться на основе анализа соскоба из влагалища и цервикального канала, то за несколько дней до процедуры необходимо воздержаться от половых контактов
Перед сдачей слюны не рекомендуется чистить зубы




Если присутствует кашель, то для анализа врач может произвести забор мокроты. Такой способ применяется редко. Небольшое количество биоматериала помещают на предметное стекло и производят исследование.

Диагностика патологии

Большая часть цитомегаловирусных инфекций не диагностируется вовсе. Пациенты попросту не торопятся обращаться в медицинское учреждение, принимая вспышку за банальную простуду. Организм с крепким иммунитетом самостоятельно подавляет активную фазу.

Несмотря на быстрое и самостоятельное излечение, защитная система человека формирует антитела, которые определяются у переболевшего в течение всей жизни. Есть ряд лабораторных тестов, которые могут установить присутствие возбудителя в организме или выявить его латентное пребывание. Обнаружить присутствие вируса можно во всех биологических жидкостях: крови, моче, слюне, вагинальном секрете и сперме. Диагностика назначается по следующим показаниям:

  • подготовка к беременности или ЭКО;
  • привычное невынашивание;
  • подозрение на развитие внтутриутробной инфекции;
  • если присутствуют симптомы мононуклеоза или гепатита, но анализ на эти болезни отрицателен;
  • повышается температура тела, но причины для этого нет;
  • атипичное развитие пневмонии в детском возрасте;
  • иммуносупрессия.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция является достоверным способом обнаружения этой инфекции. Исследование обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Установить присутствие возбудителя в организме можно даже без явных признаков, в латентном течении. Для проведения диагностики необходим материал пациента: кровь, вагинальный секрет, сперма, мазок из конъюнктивы, амниотическая жидкость, ректальный мазок или слюна. Допустимо использовать даже ткани, взятые на биопсию. Цитомегаловирус (кач) ДНК – это самый доступный, достоверный и быстрый способ установления инфекции. Дополнительно рекомендуется определение уровня специфических иммуноглобулинов.

Полимеразно-цепной реакцией осуществляют определение генетического материала вируса во взятой биологической жидкости человека. Данный способ признается преимущественным для диагностики, так как может установить присутствие даже минимальной концентрации вируса в материале. Специальной подготовки исследование не требует. Женщинам следует сдавать мазок из влагалища перед менструацией или через 48 часов после ее завершения. Мужчинам не рекомендуется мочиться в течение 3 часов до забора материала.

Серологическое исследование

Иммуноферментный анализ на ЦМВ позволяет свести к минимуму риск ложноположительных или ложноотрицательных результатов. Диагностика предполагает забор крови из вены. За несколько дней до этого нужно исключить алкоголь, нервное напряжение, а перед сдачей материала не курить и не употреблять пищу. В условиях лаборатории кровь оставляется для разделения на сгусток и сыворотку. Последняя необходима для диагностики.

В сыворотке выявляется иммунное звено, обозначающееся в результате, как IgM и IgG. Установленные нормативы позволяют определить, активно ли заболевание, появилось ли оно впервые или произошел рецидив. Острое течение предполагает проведение дополнительного исследования через несколько недель. Хроническая цитомегаловирусная инфекция говорит о том, что заражение произошло очень давно. Оценка этих показателей особенно важна для женщин, планирующих беременность или тех, кто уже находится в интересном положении.

Результат

Методом ПЦР можно узнать, инфицирован человек или нет, а ИФА установит, представляет ли он опасность для окружающих. Отрицательный результат и отсутствие антител в организме говорит о том, что пациент никогда не имел контакта с возбудителем. Для него существуют высокие риски заражения.

Читайте также:  Гомеопатия при папилломах

Полученный отрицательный результат с присутствием IgG в биологической жидкости говорит о том, что пациент когда-то давно перенес инфекцию. Сейчас она находится в латентной форме.

Обнаружение низкоавидных IgM и IgG значит, что пациент находится в острой стадии болезни. Для данной группы людей следует обязательно повторить тестирование через 2-4 недели. Если ДНК цитомегаловируса обнаружено с высокоавидными IgM и IgG, это значит, что произошла активация старого вируса.

Во время лечения необходимо периодически повторять ИФА и ПЦР на цитомегаловирус. Исследование покажет эффективность терапии, а при необходимости задаст вектор для ее корректировки.

Цитологическое исследование

Анализ мочи, слюны или мазок на определение инфекции предполагает выявление вируса в материале или его исключение. Данный способ используется реже, так как может давать неточные результаты. К тому же, цитологическое исследование не позволяет установить характер течения болезни. Результат лишь покажет есть ли вирус в организме или нет.

Для анализа собранный материал помещается под микроскоп. Отрицательным результат считается, если исследование не выявляет вируса. Обнаружение огромных клеток, характерных для цитомегаловируса, говорит о том, что возбудитель присутствует в организме пациента. Несмотря на дешевизну и доступность, все чаще на смену цитологическому анализу приходят методы ИФА и ПЦР.

Когда необходимо сдать анализ?

Днк вируса в крови человека
Анализ на цитомегаловирус необходимо сдавать женщинам в период планирования беременности, либо в первом триместре. Показания для прохождения диагностики у детей и взрослых – частые простудные заболевания, проявление симптоматики заболеваний органов желудочно-кишечного тракта при невыясненной этиологии их появления. У взрослых показанием к сдачи анализа на ЦМВ является случай незащищенного полового акта.

Где и как сдавать анализ на ПЦР на ЦМВ

Сдавать анализы на ПЦР на ЦМВ можно на усмотрение пациента – как в государственном медицинском учреждении, так и в частной клинике. Обязательными условиями успешного проведения обследования являются:

  • наличие в учреждении необходимого диагностического оборудования;
  • высокий профессионализм медицинского персонала;
  • добросовестная подготовка пациента к процедуре.

При необходимости прохождения повторного исследования на ЦМВ следует обращаться в заведение, в котором проводились предыдущие процедуры. Это позволит получить максимально точные результаты, т. к. показатели, соответствующие норме, могут отличаться в каждой диагностической лаборатории. Осуществление ПЦР-диагностики строится на реализации высоких требований в процессе проведения исследования.

Сдавать подобный анализ рекомендуется только в профессиональных лабораториях, имеющих проверенную репутацию и компетентных сотрудников, внедряющих строгие системы контроля за качеством медицинской практики (Инвитро, Гемотест и др.)

Как сдают материал на исследование

ИФА
Чтобы точно определить диагноз, выявить наличие антител, и оценить в спящем или в обостренном состоянии находится заболевание, врачи рекомендуют осуществлять комплексное обследование, которое включает в себя:

  1. Иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие цитомегаловируса в организме, считается первичной диагностикой. С его помощью обнаруживаются специфические антитела IgM и IgG — иммуноглобулины, которые информируют о первичности болезни или ее рецидиве.
  2. Полимеразная цепная реакция (ПРЦ) выявляет ДНК в таком биологическом материале, как кровь, слюна, моча, соскобы шейки матки или бронхов. Наличие положительной реакции на вирус в крови говорит о его активной фазе, если он присутствует и в другом биологическом материале, значит заболевание находится в хронической стадии.
  3. Если первые два анализа противоречат друг другу, проводят цитологию пораженного органа или биологического материала.

Посев позволяет обнаружить антитела к цитомегаловирусу. Для анализа производят забор крови, мочи, спермы, мазка из влагалища и околоплодных вод. Биологический материал помещают в специальную среду, в которой размножается вирус, и анализируют рост колоний. На основании этих данных определяется стадия болезни и вероятные способы лечения.

В некоторых случаях один анализ не может дать полную картину течения заболевания, и врачи назначают несколько видов диагностики.

Имея точное представление о распространении вируса врач может назначить соответствующее лечение.

Интерпретация доктором


Важным моментом в диагностике инфекции является не только определение нормы антител к цитомегаловирусу, но и анализ содержания различных классов иммуноглобулинов и степени их авидности. Это позволяет провести получить комплексный результат анализа крови и выбрать дальнейшие методы обследования и лечения больного.

Доктора отмечают, что соблюдение правил сдачи анализов позволяет получить достоверные результаты и снизить риски ложноположительных и ложноотрицательных данных. В связи с этим, каждому пациенту дают рекомендации о том, как сдавать кровь и в какое время это лучше всего сделать.

При проведении ИФА, у больного возможны следующие результаты:

  • анти-CMV IgG (ИХЛА) отрицательный, так же как и антитела класса M. При подобном результате, у больного отсутствует инфекцию. Особенно важно это в период планирования беременности или ее течения для подтверждения отсутствия рисков для развивающегося плода. Необходимо отметить, что подобные результаты могут отмечать в серонегативный период, продолжающийся 7-10 дней от начального проникновения герпетического вируса в организм;
  • положительные IgG, IgM, но IgG нарастает по своей концентрации, после первоначального отсутствия. При определение авидности антител к цитомегаловирусу она низкая, что свидетельствует о недавнем первичном заражении. Если подобная ситуация наблюдается у беременной, то для плода существует высокий риск;
  • если у больного IgG положительный, IgM отрицательный или достаточно низкого уровня, то это говорит о длительном существовании первичной инфекции. В подобной ситуации доктора знают, что означает CMV IgG положительный при беременности – возбудитель может проникнуть в организм плода и вызвать развитие пороков развития;
  • когда антитела к цитомегаловирусу класса IgG положительные, а IgM полностью отсутствует, и это происходит при высоких показателях авидности антител, это свидетельствует о латентной стадии болезни, т.е. длительной ремиссии. Важно понимать, что это значит – anti-CMV отрицательный? Подобная ситуация говорит о том, что у больного на протяжении 4-6 месяцев отсутствовали рецидивы заболевания. В этом случае, вероятность аномалий развития у плода минимальна;
  • в том случае, когда антитела к кардиолипину IgG и IgM повышены, но авидность достаточно низкая, у пациента наблюдается реактивация инфекционного процесса.

Важно понимать, что отвечать на вопросы: что означает положительный CMV IgG и как сдавать анализ на цитомегаловирус, должен лечащий врач, у которого необходимо всегда консультироваться до и после проведения исследований. ПЦР слюны, крови и соскобов проводят для подтверждения наличия герпесвирусной инфекции одновременно с ИФА.

Когда антитела к цитомегаловирусу IgG положительные, всегда следует определять степень их авидности. Если при выявлении антител IgG обнаружена авидность больше 140, то это свидетельствует о давности инфицирования.

Подобные результаты, а также авидность anti-CMV IgG 200 и более при высоком титре IgG соответствует ремиссии заболевания, существующего у пациента не один год.

Показатель авидности – важный диагностический показатель, который должен использоваться у всех пациентов с антителами к ЦМВ IgG положительными.

Результат анализа на цитомегаловирус

Референсные значения разных видов исследования на цитомегаловирус различаются в зависимости от возраста и пола. Если анализ проводится методом ПЦР, это позволяет установить вид инфекционного агента и его наличие в различных биологических жидкостях:

  1. Положительный результат свидетельствует об обнаружении цитомегаловирусной инфекции («обнаружен»). Подтверждает наличие персистирующего (скрытого) вируса, который пребывает в пассивной форме или выделяется в небольшом количестве.
  2. Отрицательный результат в бланке помечается «не обнаружен». Однако может не выявляться, если количество цитомегаловируса в исследуемом материале ниже линейного предела или имеются ингибиторы ПЦР реакции. Несмотря на высокую избирательность (98%) теста, его результат должен быть подтвержден серологическими исследованиями.

Расшифровка анализа на ТОРЧ (TORCH): токсоплазмоз, краснуха (R), цитомегаловирус (С), герпес (H)Цитомегаловирус Igg и Igm. ИФА и ПЦР при цитомегаловирусе. Авидность к цитомегаловирусу

Иммуноферментным методом выявляют количество антител к цитомегаловирусу. В бланке результатов дается качественная оценка — «положительно» при обнаружении антител класса М или «отрицательно» при их отсутствии. Для IgG в бланке указываются титры антител (наибольшая степень разведения образца, при котором определяются иммуноглобулины) — количественная оценка активности иммуноглобулинов. Нормой титра для иммуноглобулинов класса G является 0,5. Если показатели высокие, то в организме имеется цитомегаловирус.

Серологический маркер позволяет определить стадию заражения. Если присутствуют антитела IgM и отсутствуют IgG, то это означает, что внедрение инфекционного агента в организм произошло впервые. Если IgM отрицательные, а IgG положительные, то вирус в организме находится в латентном (спящем) состоянии. Если антитела к цитомегаловирусу положительные — IgM и IgG, то это показатель острого рецидива заболевания и снижения иммунного ответа организма.

Для установления точного момента заражения используется тест на определение авидности антител IgG. Уровень авидности пропорционален дозе и виду антигена.

Таблица расшифровки ИФА-теста на цитомегаловирус показывает:

Наименование объекта Количество Результат
Антитела IgG < 0,8
> 1,1 +
0,9-1,0 сомнительный
Антитела IgM < 0,8
> 1,1 +
0,9-1,0 сомнительный
Авидность антител IgG <40 низкая
40-60 средняя
> 60 повышенная

Антитела IgG с низкой авидностью свидетельствуют о начальной или недавней инфекции — не более 90-120 дней до проведения теста. Высокоавидные иммуноглобулины к цитомегаловирусу свидетельствуют о повторной инфекции или реактивации вируса.

Если показатель превышает 60, то инфицирование произошло более 3-4 месяцев назад. В низких титрах эти антитела определяются при спящей фазе цитомегаловируса.

Читайте также:  Перекись водорода при молочнице - способы применения

Кроме этих показателей, рассчитывается коэффициент позитивности, который показывает, насколько оптическая плотность сыворотки крови пациента выше пороговой величины. КП позволяет оценить динамику развития заболевания.

Способы лечения

Если определение цитомегаловируса ПЦР методом показало положительный результат, а иммуноферментное исследование дало дополнительные характеристики, то пациенту с яркой симптоматикой требуется лечение. Для интерпретации результатов необходимо обратиться к специалисту. Самолечение при этом заболевании недопустимо. Доктор назначит нужные лекарства, с учетом клинической картины, индивидуальных особенностей организма и результатов диагностики.

При остром течении с клиническими проявлениями (гепатит, водянка, пневмония и другими) рекомендуются противовирусные препараты: Ацикловир, Валганцикловир, Цидофовир. Дозировка, схема приема и длительность терапии устанавливаются индивидуально. Специфическое лечение предполагает введение иммуноглобулинов G-класса. При появлении вторичной инфекции пациенту необходим антибактериальный курс. Тип противомикробного лекарства устанавливается в соответствии с чувствительностью микроорганизмов, что обязывает сдать дополнительный бактериологический анализ.

В обязательном порядке терапия цитомегаловируса проводится у новорожденных детей с проявлениями врожденной инфекции. К таковым относят недоношенность, желтушность кожных покровов, подкожные кровоизлияния.

У пациентов с выявлением активных антител, но отсутствием клинических проявлений такое специфическое лечение не проводится. При необходимости им назначаются симптоматические, общеукрепляющие средства, а также рекомендуют провести повторное исследование через несколько недель.

Преимущества и недостатки метода

ПЦР-диагностика наделена массой плюсов, главные из которых:

  1. Возможность проведения теста с большим набором биологического материала:
    1. соскоб из мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища;
    2. моча, слюна, спинномозговая жидкость.
  2. Время от забора материала до получения результатов исследования не превышает 2-х суток.
  3. Высокая чувствительность метода ПЦР, что позволяет обнаружить возбудителя в отрезке ДНК CMV. Благодаря этому преимуществу, болезнь выявляется на ранних стадиях в латентной или персистирующей форме инфекции.
  4. Точность метода при исследовании любой человеческой жидкости и мазков составляет 90—95%. Но вирус может присутствовать в разных тканях, не только в исследуемых.
  5. Погрешность исследования не превышает 3—5%.

Несмотря на высокую эффективность и точность, у метода есть недостатки:

  1. Невысокая специфичность и низкая прогностическая ценность. ПЦР не позволяет отличить латентную фазу жизнедеятельности вируса от активной стадии заболевания.
  2. Невозможность дифференциации первичной инфекции ЦМВ от повторной реактивации хронической формы.
  3. Сложности с оценкой давности заражения, степени патогенности и агрессивности, присущей цитомегаловирусу.
  4. Отсутствие возможности прогнозирования развития болезни.
  5. Потребность использования дополнительных методов диагностики, например, ИФА (для уточнения данных).

Проведение ИФА

Иммуноферментный анализ или ИФА – молекулярный подход в диагностике, направленный на обнаружение специфических антител против возбудителя, а также степени их авидности к цитомегаловирусу.

Антитела к цитомегаловирусу IgM повышаются в количестве через 2-3 недели после первичного проникновения микроорганизма в организм взрослого или ребенка. При этом, средняя продолжительность их циркуляции в кровотоке – около 18 недель.

После этого их уровень достаточно быстро падает. Следует помнить, что если антитела к цитомегаловирусу IgM положительные, то это может свидетельствовать об обострении хронической инфекции.

При развитии иммунного ответа, у больного повышается уровень антител к цитомегаловирусу G класса. Обнаружение anti-CMV IgG свидетельствует о давнем наличии инфекции у человека, так как данный класс иммуноглобулинов обеспечивает хороший иммунный ответ, позволяющий предупреждать обострение инфекции.

АТ к цитомегаловирусу IgG будут выявляться у пациента всю жизнь, так как иммунитет постоянно реагирует на возбудителя в организме. В связи с этим, люди положительные по IgG к цитомегаловирусу должны проходить определение степени авидности иммуноглобулинов и обязательно исследоваться на антитела класса М.

Помимо наличия  самих антител, учитывается авидность иммуноглобулина G. Данный показатель отражает схожесть антитела к антигену, т.е. структурному белку вирусных частиц, например, к кардиолипину.

Высокая авидность антител IgG к цитомегаловирусу свидетельствует о хроническом течении инфекционного процесса, что важно при обследовании беременных женщин.

Как происходит заражение и кому показан анализ

Пути заражения довольно разнообразны – у взрослых возбудить может передаваться при половом сношении, у новорожденных в процессе родовой деятельности матери либо при лактации, цитомегаловирус у ребенка постарше проявляется после общения с зараженными сверстниками, проникая в организм со слюной. Несмотря на то, что патология может быть обнаружена у ребёнка, в 50% случаев страдают люди, возраст которых составляет 35 и более лет.

Учитывая все выше сказанное, можно выделить определенные категории среди населения, которым анализ на цитомегаловирус показан в первую очередь:

  • Женщинам, вынашивающим ребенка и тем представительницам слабого пола, которые проходят предгравидарную подготовку (комплекс мероприятий, направленных на полноценное зачатие, период беременности и появление на свет здорового младенца).
  • Новорожденным младенцам.
  • Детям, у которых часто наблюдается ОРВИ.
  • Пациентам, у которых наличествует иммунодефицит как врожденный, так и приобретенный и ВИЧ в том числе.
  • Пациентам всех возрастов с наличием злокачественных новообразований.
  • Пациентам, принимающим цитостатики.
  • Пострадавшим с клиническими симптомами цитомегаловируса.

Женщинам, планирующим зачатие либо уже тем, которые становятся на учет на ранних этапах беременности, анализ на цитомегаловирус делается сразу при посещении медучреждения. При этом необходимо проведение анализа на антитела к цитомегаловирусу, который помогает выявить их количество и определить, наблюдался ли у женщины этот вирус ранее, и имеется ли иммунитет к возбудителю.

Если анализ на цитомегаловирус показывает наличие антител Anti-CMV IgG, опасность для плода сведена к минимуму – будущая мама уже переболела патологией и выработала защиту, которая обезопасит и младенца. В случае отсутствия иммуноглобулинов обследование на вирус придется проходить не один раз на протяжении беременности, поскольку организм не подготовлен к сопротивлению инфекции.

У младенцев, только появившихся на свет, анализ крови на цитомегаловирус либо исследование мочи проводят в случае, если при наблюдении за беременной женщиной наличествует подозрение на возможность врожденной инфекции либо приобретенной при родах патологии. Диагностику проводят в первые 24-48 часов после появления ребенка на свет.

При наличии иммунодефицита проверку проводят непосредственно после его выявления. Такой подход позволит провести коррекцию терапевтического курса и дополнить схему нужными противовирусными лекарствами, избегая вместе с тем возможного рецидива либо подготавливаясь к не исключенному первичному заражению.

Анализ на ЦМВ необходим и при подготовке пациента к проведению иммуносупрессии при трансплантации органов либо тканей, при этом исследование назначают до начала процедуры.

Описание метода

ПЦР относится к одним из точнейших методов обнаружения CMV-вируса. Достоверные данные получают из взятого у пациента биологического материала, в котором выявляется и исследуется геном возбудителя, т. е. участок ДНК вируса. Количественное и качественное определение вируса заключается в многократном удвоении (амплификации) части молекулы с ДНК посредством воздействия ферментов с получением точной копии отобранного биологического материала пациента.

Осуществляется это в лаборатории на специальном реакторе. Реакция размножения проходит в несколько стадий, поэтому называется цепной. Полученный материал позволяет визуально исследовать пробу, сравнить с эталоном в базе данных, установить диагноз, на основании которого производится подбор схемы лечения.

Какое содержание антител к инфекции принято считать нормальным?

Количественное содержание иммуноглобулинов в крови выражают в виде титра. Последний представляет собой максимальное разведение сыворотки крови пациента, при котором реакция является положительной. В лабораторных исследованиях наиболее часто разводят сыворотку кратно 2 (например, 1:2, 1:4, 1:6). Титр не может показать точного числа молекул антител, но демонстрирует общую картину активности антител.

Существует так называемый диагностический титр, который применяют при расшифровке анализов на антитела к ЦМВ. Иммунологические лаборатории располагают различными тестовыми системами. У каждой тест-системы свой уровень чувствительности, а также специфический компонентный состав. Несмотря на такие отличия, все тестовые системы работают на основе принципа иммуноферментного анализа (ИФА).

О результатах исследования при проведении иммуноферментного анализа судят по степени окрашивания раствора (оптической плотности раствора), в который добавлена сыворотка крови исследуемого человека. Полученные пробы сравниваются с имеющимися контрольными образцами.

Что делать, если обнаружен цитомегаловирус в мазке?

Как выявить микроорганизм

Точная диагностика цитомегаловируса возможна только при проведении ПЦР. Это самый точный и информативная методика, позволяющий найти вирус в любой биологической жидкости. Методом ПЦР можно выявить ДНК микроорганизма в искусственных условиях (инвитро) с высокой точностью, погрешность не превышает 3-5%, это действительно наилучший показатель. При этом диагностика цитомегаловируса возможна на самых ранних стадиях, до проявления симптомов, что особенно актуально при планировании беременности или иммунодефиците. Значит, можно выявить вирус и в латентной или персистирующей форме.

Виды лабораторных анализов

Существует несколько видов анализов на ЦМВИ. В основном для исследований делают забор небольшого количества крови. Но, при необходимости, анализ на антитела к цитомегаловирусу проводится с помощью других биологических жидкостей: моча, грудное молоко, слюна.

С помощью лабораторных исследований устанавливаются:

  • наличие/отсутствие вируса в организме;
  • примерный срок заражения цитомегаловирусом;
  • текущая стадия развития заболевания (латентный или активный период).

Анализы крови на цитомегаловирус проводятся с помощью следующих методов:

  1. Молекулярно-биологический (полимеразная цепная реакция). Метод позволяет выявить в крови ДНК герперовируса 5 типа. Кроме того, с помощью ПЦР определяется первичное попадание вируса, текущая стадия развития заболевания и другие показатели.
  2. Иммуноферментный анализ (ИФА). Один из наиболее точных методов, с помощью которого диагностируется цитомегаловирусная инфекция.
  3. Вирусологический (посев материала). Метод позволяет определить наличие возбудителя в небольшой концентрации. Посев при подозрении ЦМВ применяется редко, так как результаты исследования готовы через 1-1,5 недели.
  4. Непрямая иммунофлюоренция (РИФ). Метод помогает установить примерный срок носительства цитомегаловируса.

Иногда применяется цитологический анализ, в рамках которого исследуется моча. Цитомегаловирус с помощью этого метода может быть обнаружен в 50% случаев.

Возможные исследования

Длительное скрытое течение цитомегаловирусной патологии и слабая выраженность клинических проявлений затрудняют проведение клинической диагностики.

Читайте также:  Молочница у ребенка во рту

Однако в крови у инфицированного человека происходит ряд характерных изменений, которые могут быть выявлены специальными методами – полимеразной цепной реакцией и иммуноферментным анализом.

Вирусные частицы, попадая в клетки человека, в большом количестве производят свой генетический материал – ДНК. В связи с активным размножением возбудителя, его ДНК попадает в кровь больного, что позволяет проводить анализ крови на цитомегаловирус в виде полимеразной цепной реакции.

ПЦР обладает высокой чувствительностью и позволяет выявить цитомегаловирусную инфекцию даже в латентной стадии, т.е. в отсутствии каких-либо клинических проявлений.

Помимо появления ДНК цитомегаловируса, герпес 5-го типа приводит и к другим изменениям, а именно к выработке антител.

Антитела – это специфические иммуноглобулины, являющиеся белковыми молекулами и позволяющими заблокировать размножение и распространение вирусных частиц. Всего доктора выделяют два основных класса антител:

  • антитела IgM появляются в крови больного через одну неделю после первичного заражения ЦМВ. Изначально, anti-CMV IgM имеет очень низкую активность, т.е. плохо связывается с вирусными частицами. Однако с течением времени, появляются высокоавидные антитела, обеспечивающие торможение размножения возбудителя.
  • IgG – более специфические молекулы, обладающие высокой авидностью. Они свидетельствуют о хроническом характере инфекции у человека, что необходимо учитывать при проведении дифференциальной диагностики. Антитела класса G к цитомегаловирусу с очень высокой авидностью пожизненно сохраняются у инфицированного пациента. Если больной при выявлении ЦМВ, IgG положительный, ему в обязательном порядке проводится определение иммуноглобулинов М и ПЦР-диагностика, так как правильный диагноз возможен только при комплексном подходе.

Важно отметить, что доктора рекомендуют использовать одновременно несколько диагностических подходов, что повышает чувствительность и специфичность диагностики.

Расшифровку анализа крови на цитомегаловирус должен проводить только лечащий врач, так как при неправильном диагнозе, может быть подобрано не эффективное лечение.

Цена вопроса

Стоимость проведения анализа зависит от таких факторов, как вид медицинского учреждения, специфика используемого материала и тип назначенного анализа. В среднем в коммерческих медицинских центрах проводят диагностику по следующим ценам:

  1. ПРЦ диагностика, которая определяет наличие не менее 20 инфекций стоит в среднем 90$.
  2. Сдача крови на антитела к цитомегаловирусу стоят около 12$ за один тип иммуноглобулина.
  3. Минимальная стоимость цистоскопии 50$, средняя цена 105$.
  4. Иммуноферментный анализ стоит 12$, но является первичной диагностикой, которая всегда требует дополнительных обследований.

Стоимость также зависит от вида биологического материала, который необходимо анализировать. Также цена увеличивается при срочной необходимости результатов.

Подготовка к анализу ПЦР

Чтобы получить достоверные результаты обследования, накануне проведения процедуры потребуется соблюдать нижеприведенные правила для пациентов:

  1. За 6-8 часов до сдачи крови отказаться от употребления любых продуктов питания.
  2. В течение 24-х часов, предшествующих забору биоматериала, исключить прием алкогольных напитков, физическую активность.
  3. За сутки до обследования избегать любых форм сексуальной близости.
  4. В течение 2-3 часов до взятия мазка из половых путей следует воздерживаться от мочеиспускания, курения.
  5. За неделю до сдачи анализа прекратить прием каких-либо лекарственных препаратов (в первую очередь антибиотиков).

Если сдача крови предстоит грудничку или ребенку постарше, родителям потребуется обеспечить его достаточным количеством питья. За 30 минут до процедуры следует давать малышу достаточное количество кипяченой воды.

Цитомегаловирусная инфекция во время беременности

В отдельную группу риска входят беременные женщины. При постановке на учет в женскую консультацию у каждой будущей мамы берут анализы на чувствительность к ТОРЧ инфекциям. В этот список входит определение цитомегаловируса. Отрицательные результаты говорят о том, что пациентка никогда не имела контакта с этим возбудителем. За такими женщинами осуществляется более тщательный контроль. Приобретение болезни во время вынашивания ребенка может завершиться плачевно, вплоть до прерывания беременности. Поэтому повторный анализ проводится в каждом триместре.

Если ДНК цитомегаловируса обнаруживается у будущей мамы, то она ранее имела контакт с возбудителем. Это гораздо лучше, нежели отсутствие антител. Даже если обострение произойдет сейчас, то риск для плода будет минимальный. Всего от 2 до 10 детей из 100, чьи мамы повторно болели в период беременности, рождаются с отклонениями.

Определение ДНК и отдельных антигенов

Определить наличие ДНК в исходном материале цитомегаловируса можно с помощью ПЦР или ДНК-гибридизации, оба метода являются высокочувствительными, на практике чаще используют ПЦР. Для анализа на цитомегаловирус могут быть использованы любые субстраты, даже взятые на биопсию.

ПЦР используется лишь как дополнительный метод обследования. Это связано с его высокой чувствительностью. Вместе с тем до 90% взрослого населения РФ имеют носительство цитомегаловируса, которое не означает его активность в организме. Некоторые авторы-медики предлагают считать обнаружение ДНК вируса в сыворотке крови и ликворе активной CMV-инфекцией, а обнаружение генетического материала в моче, слюне, мазках из уретры и цервикального канала/влагалища возможно и при латентном (скрытом) течении инфекции.

Расшифровка результатов обследования методами ПЦР и ДНК-гибридизацией в сочетании с определением уровней специфических иммуноглобулинов приведена в таблице ниже.

Антитела ДНК CMV при проведении ПЦР и ДНК-гибридизации О чем свидетельствует результат обследования
Нет Не обнаружен Человек не инфицирован CMV
Есть, только высокоавидные IgG Не обнаружен Человек давно перенес CMV-инфекцию, сейчас в организме вируса нет
Обнаружен в моче, слюне и т.д., в крови нет Человек перенес CMV-инфекцию давно, в организме вирус есть
Есть, IgM, IgG низкоавидные Обнаружен в крови/ликворе Человек переносит активную форму первичной инфекции, повторить обследование через 2-3 недели
Есть, IgM, IgG высокоавидные Обнаружен в крови/ликворе Активизация инфекции, до этого «спящей» в организме, второй вариант – суперинфекция, повторить обследование через 2-3 недели
Для беременных наиболее опасен вариант 3; вариант 1 подлежит обследованию каждые 3 мес. При варианте 4 вероятность поражения плода составляет 2-8%

По данным некоторых источников главным критерием активности CMV-инфекции следует считать лишь обнаружение высокого титра ДНК-CMV в крови обследуемого (1). При этом, по их мнению, наличие нарастающего титра антител (в 4 и более раз), обнаружение IgM, обнаружение ДНК вируса в крови и в моче не являются достаточными критериями для постановки диагноза.

Как бы то ни было, на текущий момент для диагностики активности CMV-инфекции в организме используют комбинацию методов: определение уровня антител и выявление самого вируса и его антигенов в различных субстратах.

Сроки готовности ПЦР-анализа

Результат будет готов в течение 2-х суток с момента сдачи биоматериала. Иногда результат готов в первый день.

Расшифровка показателей антител

При первичном инфицировании иммунная система продуцирует антитела класса IgM. Когда заболевание переходит в латентную стадию, формируются белковые вещества IgG, их концентрация является постоянной в течении всей жизни, с увеличением показателей при рецидиве болезни.

Расшифровка значений антител IgG:

  1. Менее 0.8 – вируса нет.
  2. От 0.9 до 1.0 – серопозитивный результат. Возможное инфицирование, заболевание в стадии инкубационного периода, либо цитомегаловирус отсутствует. Требуется повторная сдача анализа через 1-2 недели.
  3. Более 1.0 – цитомегаловирус присутствует в крови в активном состоянии. Требуется лечение.

Если у беременной женщины уровень антител указывает на первичное заражение, проводится ультразвуковая диагностика плода, при обнаружении аномалий развития решается вопрос о медикаментозном прерывании беременности.

Когда нужно сдать анализ крови на ЦМВ

Опасность цитомегаловируса в том, что заболевание в основном протекает в скрытой форме, но при снижении иммунитета, он поражает внутренние органы, обостряет хронические заболевания, и возникают осложнения.

Особенно страдают младенцы, у которых еще не выработался иммунитет. Группой риска, которая наиболее подвержена серьезным последствиям цитомегаловируса:

  • беременные женщины и планирующие ребенка, в том числе и путем ЭКО;
  • новорожденные груднички;
  • ребенок, который подвержен частому развитию ОРВИ;
  • пациенты с развитием опухолевых новообразований;
  • люди употребляющие цитостатики;
  • ВИЧ-инфицированные;
  • люди, ожидающие пересадку органов;
  • доноры;
  • взрослые и дети, страдающие от длительного течения заболеваний.

Женщинам, которые узнали о беременности, в первую очередь назначают данный анализ. Выявленный иммунитет будет свидетельствовать о том, мама перенесла заболевания и ее антитела позволят защитить плод. В обратном случае, требуется постоянное отслеживание ситуации, чтобы при обнаружении цитомегаловируса принять необходимые меры в кратчайшие сроки.

  Терапия гарднереллеза у женщин: препараты, дозировка, схема

Особенно важно сдать анализ людям с ВИЧ-инфекцией, для редактирования дальнейшей терапии.

Источники

  • https://venerbol.ru/citomegalovirus/dnk-pcr-obnaruzheno-chto-ehto.html
  • https://HerpesDoc.ru/hcmv/analiz-na-citomegalovirus-krov-rasshifrovka.html
  • https://veneradoc.ru/citomegalovirus/analiz-ptsr.html
  • https://herpes.guru/diagnostika/analiz-na-citomegalovirus.html
  • https://VeneroMed.ru/bolezni/pcr-citomegalovirus
  • https://VeneroMed.ru/bolezni/analiz-krovi-na-citomegalovirus
  • https://pro-herpes.ru/tsitomegalovirus/analiz-krovi.html
  • https://gerpes.expert/zabolevaniya/tsitomegalovirus/analiz
  • https://herpes.propto.ru/article/pcr-na-citomegalovirus-v-krovi-i-po-mazku
  • https://venerbol.ru/citomegalovirus/analiz-krovi-na-cmv-chto-ehto-rasshifrovka-kak-sdavat.html
  • https://bezpapillom.ru/gerpes/analiz-na-czitomegalovirus.html
  • https://nashainfekciya.ru/virus/cito/citomegalovirus-pcr.html
  • https://herpes.center/gerpesvirus/analiz-na-citomegalovirus
  • https://zpppstop.ru/zppp/sitomegalovirus/analiz-krovi-mochi-mazka.html
  • http://TvoyHerpes.ru/cytomegalovirus/pcr-diagnostika-citomegalovirusa.html

[свернуть]
Помогла статья? Оцените её
1 Звезда2 Звезды3 Звезды4 Звезды5 Звезд
Загрузка...